接下来为大家讲解小动物活体荧光成像,以及小动物活体荧光成像基于什么原理涉及的相关信息,愿对你有所帮助。
1、HeLa细胞是一种常用于构建小鼠宫颈癌模型的细胞,被广泛用于细胞培养、生物实验以及肿瘤研究中。HeLa细胞的出现为宫颈癌的治疗指明了道路,在探讨宫颈癌治疗药物和方法时,常会研究化合物对宫颈癌HeLa细胞侵袭和迁移能力以及对宫颈癌肿瘤抑制模型小鼠的存活的影响。
2、在科学研究的舞台上,Hela细胞以其独特的角色闪耀着光芒。作为第一个从人体组织中成功连续培养的非整倍体上皮样细胞系,HeLa细胞在宫颈癌研究中占据了无可替代的地位。
3、Hela细胞系,源自一位名叫Henrietta Lacks的美国女性,她在1951年因宫颈癌离世。这个细胞系的起源最初以“Helen Lane”为名,但实际上是为了保护她的隐私。Hela细胞以其独特的性质闻名,它们被称为“不死细胞”,能够无限分裂,远超正常人类细胞的生命周期。
1、小动物活体成像主要***用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则***用荧光报告基团(GFP、RFP,Cyt及dyes等)进行标记。
2、荧光成像: 以其强大的标记能力、快速成像和较低成本,适用活体和尸体成像,尤其适合实验连贯性。然而,非特异性限制了其灵敏度,检测深度受限,精确定量挑战重重。尽管可能在小分子药物标记中大展身手,但在人体应用上仍有所局限。生物发光成像: 灵敏度极高,无放射性,对小动物研究友好,特异性极佳。
3、需要。根据查询《小动物活体成像技术的原理及操作方法》文件得知,小动物活体荧光成像对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究的技术,小动物活体荧光成像动物脏器是需要固定的,保证成像过程中不发生移动。
4、\x0d\x0a\x0d\x0a 荧光标记的选择\x0d\x0a活体荧光成像技术主要有三种标记方法:荧光蛋白标记、荧光染料标记和量子点标记。荧光蛋白适用于标记肿瘤细胞、病毒、基因等。通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed)等。
荧光成像: 以其强大的标记能力、快速成像和较低成本,适用活体和尸体成像,尤其适合实验连贯性。然而,非特异性限制了其灵敏度,检测深度受限,精确定量挑战重重。尽管可能在小分子药物标记中大展身手,但在人体应用上仍有所局限。生物发光成像: 灵敏度极高,无放射性,对小动物研究友好,特异性极佳。
小鼠活体成像实验的一般步骤:实验动物准备:选择适合的小鼠品系,确保它们符合实验要求,并进行必要的驯化和适应环境。标记荧光探针或生物发光标记:根据研究需要,选择合适的荧光探针或生物发光标记物,对实验小鼠进行标记。
不一定,看你的实验目的是什么。如果研究肿瘤模型,那肯定需要裸鼠或者SCID等免疫缺陷型的小鼠了。还有你所用的荧光物质也有关系,Cy5以上应该可以活体成像。只看药物器官分布的话LZ可以用普通的小白鼠 然后剖腹观察,染料用Cy3或者其他普遍的FITC都行。
\x0d\x0a\x0d\x0a 荧光标记的选择\x0d\x0a活体荧光成像技术主要有三种标记方法:荧光蛋白标记、荧光染料标记和量子点标记。荧光蛋白适用于标记肿瘤细胞、病毒、基因等。通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed)等。
活体成像 小鼠经过常规***(气麻、针麻皆可)后放入成像暗箱平台,软件控制平台的升降到一个合适的视野,自动开启照明灯(明场)拍摄第一次背景图。下一步,自动关闭照明灯,在没有外界光源的条件下(暗场)拍摄由小鼠体内发出的特异光子。
自2009年起,祁海教授一直担任清华大学的教授,他的研究领域主要集中在免疫细胞相互作用、黏附、迁徙以及在免疫病理过程中如先天性免疫缺陷和自身免疫病中的反应性组织结构生成机制。他运用多种手段,如分子与细胞免疫学、基因工程小鼠模型以及双光子显微镜的活体成像技术进行研究。
因而,选择激发和发射光谱位于650nm-900nm的近红外荧光标记(或至少发射光谱位于该区间),更有利于活体光学成像,特别是深层组织的荧光成像。(推荐文献: Nature Method, 2005, 2: 12 如何选择合适的荧光蛋白; Science, 2009, 324: 804 钱永建教授研究成果-近红外荧光蛋白,非常适合活体荧光成像)。
以荧光探针为例,当罗丹明B通过尾静脉注射进入小鼠体内后,我们可以在小动物光学成像系统中观察到荧光在不同时间点的分布情况。2小时后,荧光开始显现,随着时间的推移,荧光分布逐渐清晰,24小时后,我们不仅能看到全身各脏器的荧光信号,还能在取材后的肿瘤、心、肝、脾、肺和肾中观察到细节。
波长设置时,给染料命名,曝光时间选择Auto,让设备自动调整最适合的参数。数据处理环节,Units平衡曝光差异,确保图像的对比度准确无误。最后的输出与整理/ indivu功能下,如果不勾选,则所有图像将统一处理,方便右侧轴的呈现。完成所有设置后,点击输出,珍贵的活体成像数据就跃然眼前了。
\x0d\x0a\x0d\x0a 荧光标记的选择\x0d\x0a活体荧光成像技术主要有三种标记方法:荧光蛋白标记、荧光染料标记和量子点标记。荧光蛋白适用于标记肿瘤细胞、病毒、基因等。通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed)等。
以荧光探针为例,当罗丹明B通过尾静脉注射进入小鼠体内后,我们可以在小动物光学成像系统中观察到荧光在不同时间点的分布情况。2小时后,荧光开始显现,随着时间的推移,荧光分布逐渐清晰,24小时后,我们不仅能看到全身各脏器的荧光信号,还能在取材后的肿瘤、心、肝、脾、肺和肾中观察到细节。
小动物活体成像技术是***用高灵敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和图像处理软件,使得可以直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。在拥有激发光多光谱分析功能的活体成像系统出现以前,科学家们被迫***取各种方法来减少动物自发荧光,比如:***用无荧光素鼠粮饲养小鼠、使用裸鼠等。
小动物活体成像 主要***用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则***用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器,让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。
活体动物体内光学成像主要***用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因(Luciferase )标记细胞或 DNA ,而荧光技术则***用绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和 FITC 、Cy5 、C y7 等荧光素及量子点 (quantumdot ,QD)进行标记。
关于小动物活体荧光成像,以及小动物活体荧光成像基于什么原理的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。
上一篇
昆虫动物儿歌视频教学
下一篇
橡皮泥做小动物的视频